培養(yǎng)基的保管注意事項(xiàng)

（１）培養(yǎng)基配成后一般需測(cè)試并調(diào)節(jié)ｐＨ，還須進(jìn)行滅菌，通常有高溫滅菌和過(guò)濾滅菌。

（２）培養(yǎng)基由于富含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，易被污染或變質(zhì)。配好后不宜久置，最好現(xiàn)配現(xiàn)用。

（３）一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后，易被細(xì)菌污染或分解變質(zhì)，因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。

（４）對(duì)一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基（如組織培養(yǎng)基），較長(zhǎng)時(shí)間的貯存，必須放在３－６℃的冰箱內(nèi)。由于液體培養(yǎng)基不易長(zhǎng)期保管，需制成粉末。

培養(yǎng)基使用常見(jiàn)問(wèn)題解答

（１）含瓊脂培養(yǎng)基冷卻至２５℃后已凝固，如何測(cè)定其ｐＨ？

答：有專門的固體培養(yǎng)基ｐＨ計(jì)。

（２）滅菌后的培養(yǎng)基是否都要測(cè)ｐＨ值？如何測(cè)定ｐＨ值？

答：每個(gè)制備批次的培養(yǎng)基都應(yīng)測(cè)定ｐＨ，可采用ｐＨ試紙或ｐＨ計(jì)測(cè)量。

（３）稀釋液滅菌后ｐＨ值是否有變化？有何影響？（如ｐＨ７．０氯化鈉－蛋白胨緩沖液，ｐＨ６．８無(wú)菌磷酸鹽緩沖液）

答：一般ｐＨ有下降現(xiàn)象，約０．２左右，不同培養(yǎng)基ｐＨ變化可能不同。

（４）孟加拉培養(yǎng)基是否可以取代玫瑰紅鈉瓊脂進(jìn)行培養(yǎng)霉菌和酵母菌？

答：根據(jù)中國(guó)藥典，采用玫瑰紅鈉瓊脂。

（５）配制ＰＨ值７．０氯化鈉－蛋白胨緩沖液時(shí)有時(shí)因?yàn)楦邏簻缇鳒缇^(guò)程溫度過(guò)高而導(dǎo)致培養(yǎng)基混濁了，這種情況緩沖液還能用嗎？

答：建議按正常溫度滅菌，混濁培養(yǎng)基建議不要使用。

（６）含瓊脂培養(yǎng)基在冷藏中形成冰晶怎么處理？銷毀還是加熱再用？

答：建議不要使用。

（７）融化的培養(yǎng)基為什么不能再冷水中冷卻？

答：防止受熱不均引起結(jié)塊。

（８）滅菌后，滅菌鍋需自然冷卻降壓才可以打開，這段時(shí)間是否會(huì)造成過(guò)度滅菌。

答：自然冷卻過(guò)程已經(jīng)計(jì)算在正常滅菌時(shí)間內(nèi)了，不會(huì)造成過(guò)度滅菌。

（９）培養(yǎng)基所用器具若使用濕熱滅菌，是否必須待干燥后才可以使用？若烘干或其它方法，中間過(guò)程怎樣防止微生物污染？

答：如果是馬上使用且不是用于非水溶性供試液的制備及實(shí)驗(yàn)，不一定要烘干；否則，應(yīng)干燥后使用，滅菌及干燥盡量在同一鍋里進(jìn)行，或用紗布和牛皮紙包扎緊密。

（１０）培養(yǎng)基的避光儲(chǔ)存，是否配置好的培養(yǎng)基其全部放避光儲(chǔ)存？

答：最好都避光保存。無(wú)條件時(shí)，光敏感的培養(yǎng)基一定要。

（１１）商品培養(yǎng)基干粉說(shuō)是加蒸餾水溶解，實(shí)際操作是否可以用純化水或注射用水？

答：只要不含有任何可能抑制或影響微生物生長(zhǎng)的物質(zhì)的水均可。

（１２）培養(yǎng)基及器具滅菌可否同一設(shè)備同滅菌時(shí)間進(jìn)行滅菌？

答：最好分開滅菌，條件不允許時(shí)可同爐滅菌，前提是都是潔凈無(wú)污染的。

（１３）培養(yǎng)基的保溫能否用６０℃的培養(yǎng)箱，它與４５℃—５５℃水浴鍋保溫方法有何不同？

答：可以用恒溫培養(yǎng)箱保溫，但保溫溫度一般是５０℃左右，且時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)，一般是不超過(guò)４小時(shí)。

（１４）培養(yǎng)基的貯存是否需要放置于２—１０℃冰箱內(nèi)？

答：需冷藏保存的培養(yǎng)基外包裝上會(huì)寫明。

（１５）培養(yǎng)基滅菌后成份會(huì)有所蒸發(fā)減少，如何處理這個(gè)問(wèn)題？

答：正常情況下蒸發(fā)量較少，可忽略不計(jì)。

（１６）培養(yǎng)基融化后出現(xiàn)渾濁是有哪些方面的原因引起的？應(yīng)如何避免？

答：可能的情況有培養(yǎng)基配置用水不符合規(guī)定、滅菌過(guò)程溫度升溫慢或降溫慢、　培養(yǎng)基儲(chǔ)存不當(dāng)、融化時(shí)沸騰時(shí)間較長(zhǎng)等。

（１７）準(zhǔn)備好的培養(yǎng)基有效期如何驗(yàn)證？

答：定期取出培養(yǎng)基驗(yàn)證其無(wú)菌性，促生長(zhǎng)能力等方面。

（１８）培養(yǎng)基配制好滅菌后，在高壓容器中保溫降至５０℃左右，可不可行？

答：建議最好不要，避免過(guò)度受熱。

（１９）脫水培養(yǎng)基對(duì)濕度是否有要求？多少適宜？

答：按要求室溫干燥環(huán)境儲(chǔ)存即可。

（２０）培養(yǎng)基ｐＨ值測(cè)定溫度在２５℃，這個(gè)溫度應(yīng)怎么控制？比如固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基使用過(guò)程中還能調(diào)節(jié)ｐＨ值嗎？

答：可水浴控制培養(yǎng)基溫度。

（２１）配制培養(yǎng)基過(guò)程中，按說(shuō)明書稱定量，加規(guī)定的純化水，煮沸溶解，為了避免煮沸過(guò)程總減少水分，是否要在配制過(guò)程適當(dāng)增加水？比如配硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基。

答：可適量增加，自己掌握。

（２２）商品培養(yǎng)基一定要當(dāng)天配當(dāng)天用嗎？可否在一周內(nèi)用完？

答：不是即配即用的培養(yǎng)基的話，儲(chǔ)存得當(dāng)，可以使用。

（２３）稱量培養(yǎng)基時(shí)，注意不要吸入粉末，這粉末是指何物？

答：就是你所稱量的干粉培養(yǎng)基　，因?yàn)榕囵B(yǎng)基的粉末對(duì)呼吸道有刺激作用，而且培養(yǎng)基中的某些成分，如亞硒酸鹽、疊氮化鈉、乙酰胺等，長(zhǎng)期吸入并在體內(nèi)累積到一定量會(huì)對(duì)人體健康有危害。所以培養(yǎng)基配制稱量需做好個(gè)人防護(hù)，且最好選擇少粉塵環(huán)保型顆粒培養(yǎng)基。

（２４）煮培養(yǎng)基，用不銹鋼鍋在電磁爐上煮可行？硫乙醇培養(yǎng)基是否要煮沸？如何煮沸？用不銹鋼鍋在電磁爐上煮沸可行嗎？可不可以水浴煮沸呢？

答：硫乙醇應(yīng)煮沸，量大時(shí)，我實(shí)驗(yàn)室用不銹鋼鍋在電磁爐上煮沸。不建議水浴煮沸，因?yàn)樗≈蠓协傊酆茈y溶，導(dǎo)致瓊脂分裝不均勻，前段分裝的瓊脂含量少，后段分裝的瓊脂含量高，導(dǎo)致有的管或瓶中的凝固。

（２５）如培養(yǎng)基在高壓滅菌器中溫度需自然下降２０度才開蓋嗎？

答：高溫滅菌器有安全閥，溫度下降到安全閥可打開時(shí)將培養(yǎng)基取出室溫冷卻，各型號(hào)滅菌器安全開蓋溫度不盡相同。

應(yīng)用場(chǎng)景

一般在實(shí)驗(yàn)室使用較多。

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