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五分類血細胞分析儀檢測原理
發(fā)布時間:2022-10-18 08:57:47

正常情況下、外周血中,有形血細胞主要包括:

紅細胞、白細胞和血小板三大類。

白細胞正常情況下又份為:有粒白細胞(中性粒細胞、嗜酸性粒細胞和嗜堿性粒細胞)和無粒細胞(淋巴細胞和單核細胞)。這樣白細胞就一共分出了五個類型,所以檢測這白細胞的五個類型的相應(yīng)血細胞分析儀就叫五份類血細胞分儀。

下面先看看各五種白細胞在正常情況下的細胞大小、細胞質(zhì)的多少、細胞核的形狀等物理結(jié)構(gòu)。

細胞直徑大小

細胞質(zhì)

細胞核

淋巴細胞

6-12微米

少、嗜堿性

大、圓

單核細胞

14-20微米

多、弱嗜堿性

卵圓形、腎形、馬蹄形或不規(guī)則形

嗜中性粒細胞N

10-12微米

細小均勻的嗜中性顆粒

桿狀或分2-5葉、以3葉為主

嗜酸性粒細胞E

12-15微米

大小一致、分布均勻的嗜酸性顆粒

常分2葉

嗜堿性粒細胞B

10-12微米

大小不一、分布不均的嗜堿性顆粒

不規(guī)則、呈分葉狀或S形

那么這五個類型的白細胞是根據(jù)什么原理來分類的呢?

目前主要是根據(jù)細胞的如下幾個特性來分類:細胞的大小、核漿比例、細胞內(nèi)細胞器的復(fù)雜程度、細胞核所含核酸的多少以及對某些化學(xué)試劑(或/和)熒光染液的敏感程度來區(qū)分之。

根據(jù)白細胞的以上特性,不同廠家、不同型號的五份類血細胞分析儀其檢測分析的原理是不同的。但其最基本的原理目前無非就以下幾種情況:

1、利用這五類細胞對不同化學(xué)試劑(溶血劑或叫溶血素)的溶解性質(zhì)不同(如嗜酸細胞試劑和嗜堿細胞試劑)以及結(jié)合白細胞直方圖細胞三分群的庫爾特(電阻抗法)檢測原理將白細胞分為五類。

例如:

    早期的Abcus?。剩酰睿椋铮颍祪x器,(行業(yè)內(nèi)常稱為假五分類),當(dāng)然比起三分群的儀器分類精準了不少,但還是存在很大偏差,因為有些細胞是采用大小分群(即脈沖的大小)和計算出來的。

2、四角度照射法:

?。梗啊憬菂^(qū)分分葉核細胞和單核細胞得到兩類:

中性粒細胞和嗜酸性粒細胞(分葉核細胞);

單核細胞和淋巴細胞及嗜堿性粒細胞(單核的嗜堿性粒細胞)。

    用90°偏振區(qū)分:

嗜酸性粒細胞和中性粒細胞。

    用0°和10°通過核質(zhì)比及細胞大小,將嗜堿性粒細胞從淋巴和單核細胞中群中分開。

    用0°根據(jù)大小區(qū)分單核細胞和淋巴細胞。

   此類儀器以優(yōu)利特生產(chǎn)的URIT5160五分類為代表。

3、細胞化學(xué)-體積法:化學(xué)性溶血劑一方面作用于紅細胞使紅細胞破壞釋放血紅蛋白,另一方面還作用于白細胞,使白細胞膜表面產(chǎn)生小孔,細胞內(nèi)漿質(zhì)外溢,細胞失水皺縮,細胞膜緊貼于核上。測定時細胞的體積大小是核、顆粒和膜成分的總和,白細胞種類不同、分化程度不同所含的胞漿顆粒、核結(jié)構(gòu)以及大小也不同。運用V.C.S三種探針,在流式通道的某一位點,對通過的單列白細胞,進行逐個的、同時的、三重的檢測,以及三維分析,以確定其亞群性質(zhì)。

V-低頻波(Volume):      采用低頻電流準確分析細胞體積;

C-高頻波(Conductivity):   采樣高頻電流分析細胞核型;

S-激    光(Scatter):   該激光束可穿透細胞,探測細胞內(nèi)核分葉狀況和胞漿中顆粒情況,分析細胞的顆粒特性。

此類儀器以貝克曼庫爾特為代表的LH750

4、利用半導(dǎo)體激光散射和核酸熒光染色技術(shù)

    前向散射光:檢測細胞的大?。?/p>

    側(cè)向散射光:檢測細胞內(nèi)細胞內(nèi)容物的復(fù)雜程度;

    側(cè)向熒光:  檢測細胞核酸的多少。

    利用這三個參數(shù)將白細胞分為五類。

此設(shè)備原理是目前較為流行的測量方法,以SYSMEX的五份類為代表,代表機型有XN等系列。

  以上這些分類方法還都在圍繞細胞的物理結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)上分析,并未對細胞進行功能性質(zhì)和生理機制的分類,筆者相信,在不遠的將來將有一次革命性的大突破。因為臨床上更喜歡細胞的功能性質(zhì)及異常細胞的分析分類,這樣的檢測結(jié)果其臨床價值及臨床意義會更大,這是趨勢!

就目前現(xiàn)狀來看、目前最經(jīng)典的方法當(dāng)然還是手工制片染色利用顯微鏡人工觀察分類,這才是金標準,但這一方法要求檢驗人員的細胞形態(tài)學(xué)的基本功要過硬,這就無疑要求檢驗人員不斷學(xué)習(xí),熟練掌握反復(fù)鍛煉對形態(tài)的觀察和辨別能力。對儀器檢測結(jié)果的異常報警提示要負責(zé)任的進行人工復(fù)檢,以防漏檢、耽誤臨床的確診及延誤患者的治療。

注意事項:

  ?。薄⒂捎谠诓±砬闆r下(白血病、貧血等),有核紅細胞的存在,使得白細胞總數(shù)異常升高,在有些儀器中,根據(jù)測量的有核紅細胞百分比,從白細胞中已扣除;但有些儀器沒有扣除,所以用戶一定要清楚自己使用的儀器性能有無從白細胞總數(shù)中扣除有核紅細胞的功能,如果沒有此功能要手工推片染色人工顯微鏡下分類,按有核紅細胞的百分比例從白細胞總數(shù)中扣除之,這一點一定要明確的寫在實驗室的SOP文件中。

   ?。病⒏叨司珳实臋z測設(shè)備當(dāng)然對臨床診斷疾病大有幫助,但設(shè)備和耗材的價格也相當(dāng)昂貴,一份價格一份貨?。∥覈赜蜻|闊,各地區(qū)、各醫(yī)院的經(jīng)濟狀況發(fā)展不均衡,所以我們一概的不能追求高大上,要根據(jù)當(dāng)?shù)亟?jīng)濟情況、政府財政資助和老百姓的經(jīng)濟收入綜合考慮,選擇適合貴院的相應(yīng)設(shè)備。

(文章來源于互聯(lián)網(wǎng))


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