ＰＣＲ技術(shù)的基本原理

該技術(shù)是在模板ＤＮＡ、引物和四種脫氧核糖核苷酸存在下，依賴于ＤＮＡ聚合酶的酶促合成反應(yīng)。

ＤＮＡ聚合酶以單鏈ＤＮＡ為模板，借助一小段雙鏈ＤＮＡ來啟動(dòng)合成，通過一個(gè)或兩個(gè)人工合成的寡核苷酸引物與單鏈ＤＮＡ模板中的一段互補(bǔ)序列結(jié)合，形成部分雙鏈。

在適宜的溫度和環(huán)境下，ＤＮＡ聚合酶將脫氧單核苷酸加到引物３′－ＯＨ末端，并以此為起始點(diǎn)，沿模板５′→３′方向延伸，合成一條新的ＤＮＡ互補(bǔ)鏈。

如何選擇ＰＣＲ管

１、材質(zhì)：ＰＣＲ　耗材一般都是　ＰＰ　材質(zhì)，因?yàn)椤。校茫遥瘢校茫摇『牟耐ǔ?huì)與試劑或樣品直接接觸，表面不易于粘附生物分子，有良好的化學(xué)耐性及溫度耐受性。

２、ＰＣＲ　管／板體積：依據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)要求選用合適的產(chǎn)品。單管和聯(lián)管是兩種最常用的形式。

３、管蓋選擇：?jiǎn)喂芎瓦B管都有平蓋和凸蓋之分，而平蓋和凸蓋各有優(yōu)點(diǎn)。平蓋適用于熒光定量ＰＣＲ。

４、管壁厚度：管壁厚度會(huì)直接影響熱傳導(dǎo)率，極薄的壁厚可優(yōu)化熱傳遞減少循環(huán)時(shí)間。進(jìn)一步減少了熱障，從而帶來更快，更穩(wěn)健的反應(yīng)。

５、顏色：ＰＣＲ板通常可提供多種不同的顏色形式，透明的　ＰＣＲ　管更有助于進(jìn)行樣品分類管理。白色　ＰＣＲ　產(chǎn)品可最大程度地反射熒光信號(hào)，減少孔間信號(hào)交叉污染，可優(yōu)化實(shí)時(shí)熒光定量　ＰＣＲ　的結(jié)果。不同品牌儀器，由于熒光檢測(cè)器位置設(shè)計(jì)不同，請(qǐng)參考生產(chǎn)廠家推薦的耗材。

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